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操作ELISA試劑盒保溫過程

2024-08-12 [770]

      這(zhe)是(shi)一(yi)個逐步平衡的(de)(de)(de)過程,因此(ci)需經(jing)擴散才能(neng)達到反(fan)(fan)應(ying)的(de)(de)(de)終(zhong)點(dian)。在其后加(jia)入的(de)(de)(de)酶標記(ji)抗(kang)休與固相(xiang)抗(kang)原的(de)(de)(de)結(jie)合(he)也同樣(yang)如此(ci)。這(zhe)就是(shi)為什么ELISA試劑(ji)盒反(fan)(fan)應(ying)總(zong)是(shi)需要一(yi)定時間的(de)(de)(de)溫育。保溫的(de)(de)(de)方式(shi)除有的(de)(de)(de)ELISA試劑(ji)盒儀(yi)器附有特制的(de)(de)(de)電熱(re)塊外,一(yi)般均采用水(shui)(shui)浴(yu),可將ELISA試劑(ji)盒板置于水(shui)(shui)浴(yu)箱中,板底應(ying)貼(tie)著水(shui)(shui)面(mian),使溫度迅速平衡。為避免(mian)蒸發,板上應(ying)加(jia)蓋,也可用塑料貼(tie)封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此(ci)時可讓反(fan)(fan)應(ying)板漂浮在水(shui)(shui)面(mian)上。

        

ELISA試劑盒

       在ELISA試劑(ji)盒(he)中一般(ban)有(you)兩次(ci)抗原抗體反(fan)應(ying),即加標本(ben)和(he)加酶結合物后。抗原抗體反(fan)應(ying)的(de)完成需要有(you)一定(ding)的(de)溫(wen)度(du)和(he)時間,這一保溫(wen)過程稱(cheng)為溫(wen)育,有(you)人稱(cheng)之為孵育,在ELISA試劑(ji)盒(he)中似不恰(qia)當。但不宜(yi)采用(yong)更高的(de)溫(wen)度(du)。抗原抗體反(fan)應(ying)4C更為,在放射(she)免(mian)疫測定(ding)中多(duo)使反(fan)應(ying)在冰箱中過夜,以形成*多(duo)的(de)沉淀。但因所需時間太長(chang),

       在ELISA試劑盒中一般不予采用。ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,后將ELISA試劑盒板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只要(yao)平(ping)置于操作臺上即可(ke)。應注意(yi)溫育的溫度和時間應按規定力求(qiu)準確。為保證這一(yi)點,一(yi)個人操作時,一(yi)次不宜多于兩塊板同時測(ce)定。