ELISA試劑盒操作技巧以及操作步驟


想要得(de)出正確結(jie)論我們就必須嚴格按照要求來進(jin)行實驗操作,尤(you)其(qi)是相關注意事項。接下(xia)來為大家說一(yi)下(xia)ELISA試劑盒操作注意事項。
ELISA試(shi)劑盒操作技巧:
1.操作前應(ying)對試(shi)(shi)驗(yan)的物(wu)理參數有充(chong)分(fen)的了解,如環境溫(wen)度(du)(du)(保(bao)持(chi)在(zai)18 C~25℃)、反響孵(fu)育(yu)溫(wen)度(du)(du)和孵(fu)育(yu)時刻、洗刷的次數等,要先檢查水育(yu)箱溫(wen)度(du)(du),ELISA試(shi)(shi)劑(ji)盒是(shi)否符(fu)合要求。
2.正(zheng)確運用(yong)加(jia)樣(yang)器(qi)加(jia)樣(yang)器(qi)應(ying)垂(chui)直加(jia)入標本或試劑,避免刮擦包被(bei)板底部。加(jia)樣(yang)過程中避免液(ye)體外(wai)濺,血清殘留在(zai)反響孔壁上,加(jia)樣(yang)器(qi)吸頭要(yao)清洗潔(jie)凈,避免污染,加(jia)樣(yang)次序要(yao)與說明書共同,否則可導致成果錯(cuo)誤(wu),試驗重(zhong)復(fu)性差(cha)。
3.手(shou)工洗(xi)(xi)板(ban)加洗(xi)(xi)液(ye)時沖(chong)擊力不(bu)要(yao)太大,洗(xi)(xi)刷(shua)次數不(bu)要(yao)超越說明書引薦(jian)的(de)洗(xi)(xi)刷(shua)次數,洗(xi)(xi)液(ye)在(zai)反響孑L內停留的(de)時刻(ke)不(bu)宜太長(chang)。不(bu)要(yao)使洗(xi)(xi)液(ye)在(zai)孑L間竄流(liu),形成孔(kong)問污(wu)染,導(dao)致假陰性或假陽性。
4.要確保加液量(liang)共同 咱們(men)在運用時(shi)感覺(jue)滴(di)瓶(ping)加液不如加樣器好,滴(di)瓶(ping)不易控制加液量(liang)禁絕(jue),形成顯色不統一,判別錯(cuo)誤(wu)。
5.顯色(se)液量(liang)不(bu)可(ke)過(guo)多 加樣的(de)工(gong)作(zuo)環境不(bu)能(neng)處于陽光(guang)直射的(de)環境下,加顯色(se)系統后要避光(guang)反響,顯色(se)液量(liang)不(bu)能(neng)過(guo)多,以免顯色(se)過(guo)強。
ELISA試劑盒實(shi)驗操作(zuo)步驟:
1.試(shi)劑盒(he)從冷藏環境中取出應在室溫(wen)平衡15-30分鐘后方(fang)可使用(yong),酶標包被(bei)板開(kai)封后如未用(yong)完,板條(tiao)應裝(zhuang)入密封袋(dai)中保存。
2.濃洗(xi)滌液(ye)可(ke)能會有結(jie)晶析出,稀釋時(shi)可(ke)在水浴中加溫助溶,洗(xi)滌時(shi)不影響(xiang)結(jie)果。
3.各步加(jia)(jia)樣均(jun)應使用加(jia)(jia)樣器,并經常校對其準確性,以避免(mian)試驗(yan)誤差。一(yi)次(ci)加(jia)(jia)樣時間(jian)控制在(zai)5分(fen)鐘(zhong)內,如標本數(shu)量多,推(tui)薦使用排槍加(jia)(jia)樣。
4.請(qing)每次(ci)測定(ding)(ding)的(de)同時做標(biao)準曲線,做復孔(kong)(kong)。如標(biao)本(ben)中(zhong)待測物質(zhi)含(han)量過高(樣本(ben)OD值大于標(biao)準品(pin)孔(kong)(kong)孔(kong)(kong)的(de)OD值),請(qing)先用樣品(pin)稀(xi)釋液稀(xi)釋一定(ding)(ding)倍數(n倍)后再測定(ding)(ding),計算時請(qing)*后乘以總稀(xi)釋倍數(×n×5)。
5.封板膜(mo)只限(xian)一次性使用(yong),以避免交(jiao)叉(cha)污染(ran)。
6.底(di)物請避(bi)光保(bao)存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試(shi)驗結果判定必須以(yi)酶標儀讀(du)數為準.
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