国产内射在线激情一区_久久综合丝袜日本网_欧美精品VIDEOSEX极品_久久久综合香蕉尹人综合网

首頁 > 技術文章 > 雞ELISA試劑盒的用抗體抗原分析

雞ELISA試劑盒的用抗體抗原分析

2024-07-26 [1330]

 ;      雞ELISA試(shi)劑(ji)盒(酶聯免疫分析試(shi)劑(ji)盒)包(bao)(bao)被(bei)固相載體的(de)(de)抗(kang)體應具(ju)有高(gao)(gao)親(qin)和(he)力(li)和(he)高(gao)(gao)特異性,可取(qu)材于抗(kang)血清或含(han)單(dan)(dan)克隆抗(kang)體的(de)(de)腹水或培養液。如(ru)免疫用(yong)(yong)抗(kang)原中(zhong)(zhong)含(han)有雜(za)質(即便是(shi)極微量的(de)(de)),在(zai)抗(kang)血清中(zhong)(zhong)將(jiang)(jiang)出現雜(za)抗(kang)體,必須(xu)除去(qu)(可用(yong)(yong)吸(xi)收(shou)法)后(hou)才能用(yong)(yong)于,以保證(zheng)試(shi)驗的(de)(de)特異性。抗(kang)血清不(bu)(bu)能直(zhi)接(jie)用(yong)(yong)于包(bao)(bao)被(bei),應先提(ti)取(qu)IgG,通常采用(yong)(yong)硫酸(suan)(suan)銨(an)鹽析和(he)Sephadex凝膠過(guo)濾法。一(yi)般(ban)經硫酸(suan)(suan)銨(an)鹽析粗提(ti)的(de)(de)IgG已可用(yong)(yong)于包(bao)(bao)被(bei),高(gao)(gao)度(du)(du)純化(hua)的(de)(de)IgG性質不(bu)(bu)穩定(ding)。如(ru)需(xu)用(yong)(yong)高(gao)(gao)親(qin)和(he)力(li)的(de)(de)抗(kang)體包(bao)(bao)被(bei)以提(ti)高(gao)(gao)試(shi)驗的(de)(de)敏(min)感(gan)性,則(ze)可采用(yong)(yong)親(qin)和(he)層析法以除去(qu)抗(kang)血清中(zhong)(zhong)含(han)量較多的(de)(de)非特異性IgG。腹水中(zhong)(zhong)單(dan)(dan)抗(kang)的(de)(de)濃度(du)(du)較高(gao)(gao),特異性亦較強,因此不(bu)(bu)需(xu)要(yao)作吸(xi)收(shou)和(he)親(qin)和(he)層析處理,一(yi)般(ban)可將(jiang)(jiang)腹水作適當稀(xi)釋后(hou)直(zhi)接(jie)包(bao)(bao)被(bei),必要(yao)時(shi)也可用(yong)(yong)純化(hua)的(de)(de)IgG。應用(yong)(yong)單(dan)(dan)抗(kang)包(bao)(bao)被(bei)時(shi)應注意(yi),一(yi)種(zhong)單(dan)(dan)抗(kang)僅(jin)針對一(yi)種(zhong)抗(kang)原決定(ding)簇,在(zai)某些情況下,用(yong)(yong)多種(zhong)單(dan)(dan)抗(kang)混合包(bao)(bao)被(bei),可取(qu)得好的(de)(de)效果。

雞ELISA試劑盒

      重組抗原的另一特點是能用基因工程制備某些無法從天然材料中分離的抗原物質。例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培養成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量極微。目前檢測抗HCV 雞ELISA試(shi)劑盒(he)中所用包被抗原大多為根據HCV的基因克隆表達而制備的重組抗原。在傳染病診斷中,不少重組抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在雞ELISA試劑盒中取得應用。合成(cheng)多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)是根據蛋(dan)白質抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)分子的(de)某(mou)一抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)(ding)簇(cu)的(de)氨基酸序列人工合成(cheng)的(de)多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)片段。多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)一般只含有一個抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)(ding)簇(cu),純度(du)高(gao),特異性也(ye)高(gao),但由(you)于分子量(liang)太小,往(wang)往(wang)難(nan)于直接吸附于固(gu)相上。多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)包被一般需(xu)先使其與(yu)無關蛋(dan)白質如(ru)牛(niu)血(xue)清白蛋(dan)白質(BSA)等偶(ou)聯,借助(zhu)于偶(ou)聯物與(yu)固(gu)相載體的(de)吸附,間接地結合到固(gu)相載體表面(mian)。應用多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)另一注(zhu)意(yi)點(dian)為他僅能檢測(ce)與(yu)其相應的(de)抗(kang)(kang)體。一種蛋(dan)白質抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)往(wang)往(wang)含有多(duo)(duo)(duo)個不(bu)同的(de)能引(yin)起抗(kang)(kang)體產(chan)生的(de)決(jue)定(ding)(ding)簇(cu),因(yin)此在受檢血(xue)清中的(de)其他抗(kang)(kang)體就不(bu)能與(yu)該多(duo)(duo)(duo)肽(tai)(tai)(tai)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)發生反(fan)應。

      雞(ji)ELISA試劑盒(酶聯免疫分(fen)析試劑(ji)盒)用于包被固(gu)相載體(ti)的(de)(de)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)按其來源不同(tong)可(ke)(ke)分(fen)為天然抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)、重組抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)和合(he)成(cheng)多肽抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)三大(da)類。天然抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)可(ke)(ke)取(qu)(qu)自動物(wu)(wu)組織、微生(sheng)物(wu)(wu)培養物(wu)(wu)等(deng),須(xu)經提(ti)(ti)取(qu)(qu)純化才能作包被用。如HBsAg可(ke)(ke)以(yi)從(cong)攜帶者的(de)(de)血清中(zhong)提(ti)(ti)取(qu)(qu),一般的(de)(de)細菌(jun)和病毒抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)可(ke)(ke)以(yi)從(cong)其培養物(wu)(wu)中(zhong)提(ti)(ti)取(qu)(qu),蛋白成(cheng)份抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)可(ke)(ke)從(cong)富(fu)含此抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)材(cai)料中(zhong)提(ti)(ti)取(qu)(qu)等(deng)(例如AFP從(cong)臍(qi)帶血或(huo)胎肝中(zhong)提(ti)(ti)取(qu)(qu))。

       重組抗原是抗原基因在質粒體中表達的蛋白質抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為質粒體。重組抗原的優點是除工程菌成份外,其他雜質少,而且無傳染性,但純化技術難度較大。以大腸桿菌為質粒體的重組抗原如不能充分除大腸桿菌成份,用于雞ELISA試(shi)劑盒,在反(fan)應中可出現假(jia)陽性,因不少受檢(jian)者受大腸桿菌感染(ran)而(er)在血(xue)清中存在抗大腸桿菌抗體。